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小鼠腎小球內皮細胞培養試劑盒培養 | Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells | 來電可享受優惠 |
小鼠腎小球內皮細胞培養試劑盒【Mouse Kidney PrimaCell: Normal Endothelial Cells】
小鼠腎小球內皮細胞培養試劑盒培養腎小球(glomerulus)為血液過濾器,腎小球毛細血管壁構成過濾膜。其中,小鼠腎小球內皮細胞分離自小鼠腎組織,腎小球內皮細胞是一類特殊微血管類型的細胞,能夠調節腎小球過濾。它是組成過濾屏障內壁的重要部分,與腎小球的病理生理過程有關。小鼠腎小球內皮細胞傳5代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。 雖然腎小球內皮組織機械韌性很強,但利用本公司試劑盒中提供的腎小球內皮組織分離體系來分離,EDTA/EGTA處理過的腎小球內皮組織片能使得腎小球內皮細胞一些功能特性發生改變,從而將腎小球內皮細胞分離開來。
本試劑盒適用于分離培養小鼠腎小球內皮細胞。本體系提供了佳的組織分離條件,分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外,本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系,可以大程度地降低所培養的腎小球內皮原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠腎小球內皮細胞培養試劑盒適合于培養小鼠的腎小球內皮細胞。本試劑盒包含: ()OptiTDSTM小鼠腎小球內皮細胞組織解離液 (3×ml) (2)小鼠腎小球內皮細胞組織處理緩沖液 (00ml) (3)FibrOutTM小鼠腎小球內皮細胞成纖維抑制劑 (ml(500x)) (4)小鼠腎小球內皮組織洗液(5 x 00 ml) (5)小鼠腎小球內皮細胞生長因子(ml500x)及血清(5x0ml) (6)小鼠腎小球內皮細胞基礎培養基(5 x 00ml) (7)小鼠腎小球內皮組織預備液 ( x 00 ml) (8)小鼠腎小球內皮細胞培養試劑盒使用說明書
培養步驟:
小鼠腎小球內皮細胞培養試劑盒培養對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?
泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠肺動脈成纖維細胞*培養基
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞)蘇云金芽胞桿菌多窩亞種 Bacillus thuringiensis subsp. tolwerthi
酸鏈球菌 Lactococcus lactis纖細正青霉 Eupenicillium gracilentum
HCT 6(人結腸細胞)香菇 Lentinula edodes
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae6-0B, 人鼻咽細胞系
黑曲霉 Aspergillus niger糖化酵母 Saccharomyces diastaticus
大鼠腦成纖維細胞*培養基苜蓿中華根瘤菌
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactisRIN-m5f(大鼠胰島β細胞瘤細胞)
阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii屎腸球菌 Enterococcus faecium
小鼠腎小球內皮細胞培養試劑盒培養*英文名稱:Cefadroxil分子式:363.39分子量:C6H7N3O5S:66592-87-8
6-METHOXY-2-OXO-,2,3,4-TETRAHYDROQUINOLINE-4-CARBOXYLICACID英文名稱:ACID 6-METHOXY-2-OXO-,2,3,4-TETRAHYDROQUINOLINE-4-CARBOXYLIC分子式:分子量: CHNO4:959237-42-4
2-(4-BOC-PIPERAZINYL)-2-(2-TRIFLUOROMETHYL-PHENYL)ACETICACID英文名稱:2- (4-BOC-PIPERAZINYL) -2- (2-TRIFLUOROMETHYL-PHENYL) ACID ACETIC分子式:388.38分子量: C8H23F3N2O4:885274-23-7
羅卡因英文名稱:Ropivacaine分子式:274.4分子量: C7H26N2O:84057-95-4
5-芐硫四氮唑分子式:92.24英文名稱:5- benzylthio tetrazoline:287-47-6分子量: C3H6N4S
-CBZ-4--分子式:248.32英文名稱:-CBZ-4- amino piperidine:57023-34-2分子量: C4H20N2O2
四溴甲分子式:449.8英文名稱:Four bromine toluene:5442-9-8分子量: C0H0Br4
4-丁啉分子式:43.23英文名稱:4- butyl morpholine:005-67-0分子量: C8H7NO
2-氯乙砜分子式:204.67英文名稱:2- ethyl phenyl group:938-09-0分子量: C8H9ClO2S
2--5-甲吡分子式:08.4英文名稱:2- amino -5- methyl pyridine:603-4-4分子量: C6H8N2
注意事項:
. 接收到小鼠腎小球內皮細胞培養試劑盒培養,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%*-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
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